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本制品是经基因工程改造的热稳定T7 RNA聚合酶，对噬菌体T7启动子序列具有高度特异性，跟野生型噬菌体T7 RNA聚合酶相比，它可在更高的温度下进行反应。热稳定T7 RNA聚合酶可在37～52℃条件下进行高效的体外转录。

• 合成单链RNA，包括mRNA，siRNA，gRNA等各类RNA的前体。
  
• 合成标记或未标记的高特异性RNA探针。
  
• 利用帽子类似物合成加帽的mRNA。

• 蛋白纯度检测：本品经SDS-PAGE检测纯度≥95%。
  
• 核酸内切酶残留检测：将酶液与超螺旋质粒DNA在37℃温育4h，通过DNA电泳检测质粒无变化。
  
• DNase残留检测：将酶液与双链DNA底物在37℃温育16h，通过DNA电泳检测双链DNA底物无变化。
  
• RNase残留检测：将酶液与RNA在37℃温育1h，通过电泳检测RNA无降解。
  
• 功能检测：体外转录合成实验，通过RNA电泳可以检测到目的条带。

• 模板DNA的纯度对体外转录反应至关重要。质粒DNA抽提过程中引入的RNase A残留会显著影响转录RNA的质量，建议使用OD260/280为1.8~2.0的高纯度RNase-free质粒。
  
• 模板DNA可通过线性化环状质粒或PCR获得。模板DNA上游需含有T7启动子序列，下游为平末端或编码链5'末端突出。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套及口罩进行实验操作。

• 推荐反应体系：
  

  成分	用量	终浓度
  10×T7 RNA Polymerase Buffer	2μL	1×
  CTP/GTP/ATP/UTP (100mM each)	0.1～0.4μL each	0.5～2mM each
  RNase Inhibitor (40U/μL)	0.5～1μL	1～2U/μL
  模板DNA	0.1～1μg	-
  热稳定T7 RNA聚合酶(50U/μL)	1～2μL	-
  Nuclease-Free Water	至20μL	-

  注：建议加完Nuclease-Free Water，再加CTP/GTP/ATP/UTP。
  
• 推荐反应条件：50℃反应1h。
  
• 反应结束后，可向上述20μL反应液中加入1μL dsDNase，37℃孵育15min用于去除DNA模板。